通型生物顯微鏡的放大倍數(shù)可達(dá)幾百倍.一般真菌和酵母菌等微生物個(gè)體較大,用低倍物鏡和高倍物鏡即可得到良好的效果.但要看到經(jīng)染色的細(xì)菌的形態(tài)和真核生物細(xì)胞的形態(tài)構(gòu)造,較好使用油鏡頭.
油鏡比干燥系高倍物鏡的工作距離短得多,較短的只有0.1mm,且調(diào)焦程序又不同于干燥系物鏡,操作時(shí)須特別細(xì)心,防止油鏡壓碎標(biāo)本或損壞油鏡.
顯微鏡油鏡原理

由于細(xì)菌體積微小,故在細(xì)菌的形態(tài)學(xué)研究中,經(jīng)常需要借助顯微鏡油鏡,才能比較清楚地進(jìn)行觀察.因此,必須熟練地掌握油鏡的使用及保護(hù)法.
(一)油鏡頭的識(shí)別:
各接物鏡的放大率可由其外形辨認(rèn),鏡頭長度越大,鏡片直徑越小,放大倍數(shù)大;反之,放大倍數(shù)小.油鏡頭長度大于低、高倍鏡,鏡頭下緣一般刻有一圈黑線或白線,并刻有100×、1.25或oil等字樣.
(二)油鏡的使用法:
1、使用顯微鏡油鏡時(shí),必須將顯微鏡端正直立桌上,不得將鏡臂彎曲,使載物臺(tái)傾斜,以免香柏油流溢,影響觀察,污染臺(tái)面.
2、調(diào)焦距: A、轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使載物臺(tái)徐徐上升(或使鏡筒漸漸下降),直至油鏡頭浸沒至油中.此時(shí)眼睛應(yīng)從側(cè)面觀察,以免壓碎標(biāo)本片和損壞鏡頭.
B、將標(biāo)本片放載物臺(tái)上,用標(biāo)本推進(jìn)器固定,將欲檢部分移至接物鏡下.先用低倍鏡找出標(biāo)本的位置,然后提高鏡筒,在標(biāo)本的待檢部位滴鏡油一滴,再換油鏡觀察.
C、然后雙眼移至接目鏡,一面從接目鏡觀察,一面反方向緩慢地轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器(下降載物臺(tái),或上升鏡筒),當(dāng)出現(xiàn)模糊物象時(shí),換用細(xì)調(diào)節(jié)器,轉(zhuǎn)動(dòng)至物象清晰為止.
D、觀察完畢,應(yīng)先提高鏡筒,并將油鏡頭扭向一側(cè),再取下標(biāo)本片.油鏡頭使用后,應(yīng)立即用擦鏡紙擦凈鏡頭上的油.若鏡油粘稠干結(jié)于鏡頭上,可用擦鏡紙蘸少許二甲苯擦拭鏡頭,并隨即用干的鏡紙擦去殘存的二甲苯,以免二甲苯滲入,溶解用以粘固透鏡的膠質(zhì)物,造成鏡片移位或脫落.
3、對(duì)光:
采用天然光為光源時(shí),宜用平面反光鏡;若用人工燈光時(shí),則用凹面鏡.
首先打開光圈,轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡,使光線集中于集光器.可根據(jù)需要,上下移動(dòng)集光器和縮放光圈,以獲得較佳光度.
一般用低倍鏡或高倍鏡觀察物象或用油鏡檢查不染色標(biāo)本時(shí),需下降集光器并適當(dāng)?shù)乜s小光圈,使光度減弱;若用油鏡檢查染色標(biāo)本時(shí),光度宜強(qiáng).應(yīng)將顯微鏡亮度開關(guān)調(diào)至較亮,光圈完全打開,集光器上升至與載物臺(tái)相平.
先在干燥系高倍物鏡下找準(zhǔn)被檢物,并置于視野中央,然后升高鏡筒約1.5cm,再把油鏡頭旋轉(zhuǎn)至對(duì)準(zhǔn)正下方.在玻片標(biāo)本的鏡檢部位滴一滴浸液(鏡頭油),將頭偏于一側(cè)觀察,下降鏡筒,到物鏡的前透鏡與浸液接觸時(shí)停止.繼而從目鏡里細(xì)心觀察視野,旋轉(zhuǎn)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩慢地上升,剛出現(xiàn)不太清晰的物象時(shí)就換用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,至物象清晰后進(jìn)行觀察.
初次使用油鏡,也可按照干燥系物鏡的調(diào)焦程序調(diào)節(jié)焦距.即先下降鏡筒至物鏡較接近蓋玻片,但絕不能壓在標(biāo)本上,再上升物鏡調(diào)焦.但此法有將浸液擠出去和造成空泡的缺點(diǎn).若上調(diào)粗準(zhǔn)焦螺旋時(shí),鏡筒已升到油浸鏡頭離開油滴,仍不能發(fā)現(xiàn)被檢目的物,須重新調(diào)節(jié).
油鏡使用完畢,提升鏡筒約2cm,把油鏡轉(zhuǎn)離光軸,先用擦鏡紙擦去鏡頭上的大部分油,再用浸少量二甲苯的擦鏡紙擦去鏡頭上的殘余油跡,較后用干擦鏡紙擦去鏡頭上的二甲苯.擦拭時(shí)要順鏡頭的直徑方向,不要沿鏡頭的圓周方向擦.玻片標(biāo)本上的油也要進(jìn)行清潔,即把一小張擦鏡紙蓋在載玻片油滴上,在紙上滴一些二甲苯,趁濕把紙往外拉,這樣連續(xù)作三四次即可干凈(如果是使用石蠟油,清潔時(shí)只用擦鏡紙不必滴二甲苯).
油鏡使用的鏡頭油為香柏油或石蠟油.因香柏油黏稠度較高,使用之后擦拭較麻煩,因而許多人采用石蠟油代替使用.滴浸液時(shí),要盡量避免氣泡的形成,如果形成了氣泡,可用解剖針尖將氣泡排在一邊,以免影響觀察.
由于細(xì)菌體積微小,故在細(xì)菌的形態(tài)學(xué)研究中,經(jīng)常需要借助顯微鏡油鏡,才能比較清楚地進(jìn)行觀察.因此,同學(xué)們必須熟練地掌握油鏡的使用及保護(hù)法.
油鏡的使用原理:
油鏡的透鏡很小,光線通過玻片與油鏡頭之間的空氣時(shí),因介質(zhì)密度不同,發(fā)生折射或全反射,使射入透鏡的光線減少,物象顯現(xiàn)不清.若在油鏡與載玻片之間加入和玻璃折射率(n=1.52)相近的香柏油(n=1.515),則使進(jìn)入透鏡的光線增多,視野亮度增強(qiáng),使物象明亮清晰.
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